A determinação da creatinina é ferramenta
importante e precisa no diagnóstico da função
renal. A substância, sintetizada principalmente no
fígado e nos rins, é produzida e excretada em um
ritmo constante independentemente da dieta, grau
de hidratação e metabolismo proteico. Por isso, é
parte comum da rotina laboratorial. A reação
enzimática colorimétrica se dá:
A A creatinina catalisa a oxidação para ácido
glicônico e peróxido de hidrogênio. Através de
uma reação oxidativa de acoplamento catalisada
pela peroxidase, o peróxido de hidrogênio
formado reage com 4-aminoantipirina e fenol
formando um complexo de cor vermelha
(antipirilquinonimina), cuja absorbância medida
em 505 nm, é diretamente proporcional à
concentração de creatinina na amostra.
B A creatinina, presente na amostra, através da ação
da enzima Creatinina Amidohidrolase é
convertida em Creatina. Esta é hidrolisada pela
ação da enzima Creatina Amidinohidrolase à
Sarcosina e Uréia. A Sarcosina, após
desmetilação oxidativa, pela Enzima Sarcosina
Oxidase, produz Glicina, Formaldeído e Peróxido
de Hidrogênio. O Peróxido de Hidrogênio reage
então com o TOPS e 4-aminoantipirina, na
presença da Peroxidase, produzindo Quinoneimina. A absorbância máxima desta
formação é de 546nm e a intensidade de cor do
produto é proporcional à concentração de
creatinina na amostra.
C A creatinina é hidrolisada a íons Amônio e CO2
pela Urease. Em pH alcalino e na presença de
Salicilato e Hipoclorito de Sódio, a Amônia
origina um composto esverdeado, cuja
intensidade de cor é proporcional à concentração
de creatinina na amostra analisada
D Os quilomicrons, as lipoproteínas de muita baixa
densidade e as lipoproteínas de baixa densidade
são quantitativamente precipitadas com
fosfotungstato e íons magnésio. Após
centrifugação, o sobrenadante contém as
lipoproteínas de elevada densidade cujo
colesterol é quantificado fotometricamente
mediante as reações acopladas descritas abaixo.
A absorbância do complexo formado (vermelho),
medida em 500 nm, é diretamente proporcional à
concentração de creatinina da amostra.