Verifique as sequências de tratamentos químicos e das centrifugações objetivando a purificação de um fitovirus de partíc...

Extração com tampão fosfato de potássio 0,2 M pH 8,5 (1:2 p/v); clarificação com clorofórmio/N-butanol (1:1) refrigerado (10% do volume do extrato); ultracentrifugação com cloreto de césio por 3h; ressuspensão do vírus com baixo volume de tampão de fosfato de potássio 0,05M pH 7,0.

Extração com tampão Tris-HCl 0,5 M pH 6,8 (1:2 p/v); baixa centrifugação; clarificação com tetracloreto de carbono/clorofórmio (1:1) refrigerado (15 % do volume); dois ciclos de centrifugação isopícnica (20h) e baixa centrifugação; vírus ressuspenso com tampão de Tris-EDTA 0,1M pH 7,2.

Extração com tampão fosfato de sódio 0,1M pH 7,5 contendo sulfito de sódio; clarificação com N-butanol; 5.000 g/15 minutos; polietileno glicol e NaCl; baixa centrifugação; ressuspensão; ultracentrifugação em gradiente de sacarose por 2h; ultracentrifugação em tampão por 20h; vírus ressuspenso com tampão fosfato de sódio 0,1M pH 7,5.

Extrato foliar obtido com tampão de citrato de sódio 0,2M pH 8,0 e clarificado com etanol (1:3 v/v); ultracentrifugação em gradiente de sacarose 10-40% por 16h; baixa centrifugação; ultracentifugação em tampão de citrato de sódio 0,1M pH 7,0; ressuspensão do vírus com tampão citrato de sódio 0,05 M pH 6,5.

Extração com tampão fosfato de sódio 0,3 M pH 7,0 acrescido de EDTA a 0,8 M; baixa centrifugação; clarificação com polietileno glicol acrescido de cloreto de césio (1%); 5.000 g/ 15 minutos; ressuspensão e centrifugação zonal por 20 h; baixa centrifugação e ressuspensão viral em tampão fosfato de sódio 0,1 M pH 7,5.