Células são geralmente coradas com sondas fluorescentes
chamadas fluorocromos. Os fluorocromos são capazes de
captar a presença de componentes que de outra forma não
seriam visíveis. Sobre os princípios técnicos aplicados ao uso
de fluorocromos pode se dizer que:
A as sondas fluorescentes têm aplicabilidade limitada devido
às características e barreiras presentes durante a identificação
de diferentes populações celulares, superfície celular de
receptores, organelas intracelulares ou mesmo populações
de células apoptóticas.
B o comprimento de onda de emissão de qualquer fluorocromo será sempre menor que seu comprimento de onda
de excitação.
C as características importantes de um fluorocromo incluem o
baixo espectro de absorção no qual um composto
fluorescente pode ser excitado, e o baixo comprimentos de
onda emitidos.
D o uso do deslocamento de Stokes pode ser determinado pela
diferença entre os comprimentos de onda máxima de
absorção e emissão, entretanto, este parâmetro não permite
determinar a qualidade de um fluorocromo.
E as sondas fluorescentes podem ser usadas em uma ampla
gama de aplicações: identificação de diferentes populações
celulares, superfície celular de receptores ou organelas
intracelulares, classificação celular, imunofenotipagem,
determinação do conteúdo de ácido nucleico, medição de
atividade enzimática e populações de células apoptóticas.