Os princípios metodológicos da citometria de fluxo
consideram duas principais análises conhecidas, a primeira
denominada non-sorting flow cytometry, que determina
atributos celulares sem separação física com a dispersão e a
emissão de fluorescência, e a segunda denominada sorting flow
cytometry, que permite a análise e a purificação de células e
partículas, como, por exemplo, o fluorescent activated cell
sorters (FACs).
Os FACs permitem a purificação de células marcadas com
fluorescência dentre uma concentração de células mistas. Sobre
o seu funcionamento considere que:
I. no componente fluídico de um citômetro permite a coleta e
transporte amostral, enquanto que o componente óptico
proporciona a excitação da partícula/célula, que é conectada
a uma rede eletrônica de detectoresligada a um computador.
II. a rede eletrônica detecta o sinal emitido e converte em dados
digitais não proporcionais à intensidade da luz que estão
conectadas ao software computacional que executa a
análise de dados.
III. o processo é baseado na radiação laser direcionada, que
excita substâncias fluorescentes presentes nas células, que
podem ser compreendidas por interpolação das informações
biológicas, moleculares e/ou químicas das células em
suspensão.
IV. a citometria de fluxo pode ser empregada em diversas
aplicações, seja na detecção de células inteiras, e
componentes celulares tais como organelas, núcleos ou
moléculas de DNA, RNA.
Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que: