No Brasil, a cocirculação de diferentes arbovírus reforça a necessidade do desenvolvimento de protocolos
de diagnóstico molecular rápidos, específi cos, sensíveis e
que permitam a detecção, sempre que possível, de mais
de um arbovírus na mesma reação. Dentre os protocolos
de amplificação do genoma viral, as técnicas em tempo
real apresentam vantagens neste contexto, principalmente
quando utilizam sondas marcadas com fluoróforos. Sobre a
técnica supracitada, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas
(F) as afirmativas a seguir:
I. As sondas são marcadas com uma molécula que emite
fluorescência (quencher) numa extremidade e com
uma molécula que absorve a fluorescência (reporter)
na outra extremidade.
II. Em um protocolo para alvos múltiplos (multiplex) numa
mesma reação, as sondas específi cas para cada sequência genômica poderão ser marcadas com a mesma
molécula repórter, necessitando somente de moléculas
quencher distintas.
III. Durante o desenho dos oligonucleotídeos, a região de
hibridização da sonda deve estar localizada à montante
da região de hibridização do primer sense (forward).
As afirmativas I, II e III são, respectivamente: