O método de Sanger baseia-se em uma reação
de sequenciamento com utilização de terminadores
de cadeia (didesoxinucleotídeos, ddNTPs) marcados com fluorescência, além de nucleotídeos naturais (dNTPs). Originalmente, o produto da reação
era submetido a uma eletroforese em gel de poliacrilamida que permitia realizar a leitura da sequência inicial de DNA. Atualmente, a eletroforese é feita
em capilar dentro dos sequenciadores automáticos.
Sobre o método, assinale a opção correta.
A A reação de sequenciamento de Sanger é
realizada com dois iniciadores por reação e
uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs
encontram-se em maior quantidade do que os
dNTPs e a leitura da sequência é realizada de
cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.
B A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e
uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs
encontram-se em maior quantidade do que os
dNTPs e a leitura da sequência é realizada de
cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.
C A reação de sequenciamento de Sanger é
realizada com dois iniciadores por reação e
uma mistura de nucleotídeos dNTPs e ddNTPs, onde os ddNTPs encontram-se em maior
quantidade do que os dNTPs, e a leitura da
sequência é realizada de baixo para cima no
gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.
D A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e
uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs
encontram-se em maior quantidade do que os
dNTPs e a leitura da sequência é realizada de
baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente) após a eletroforese.
E A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e
uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os dNTPs
encontram-se em maior quantidade do que os
ddNTPs e a leitura da sequência é realizada de
baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.