Uma estratégia importante para a análise de genes e
outras sequências de interesse começa com a construção de
uma biblioteca de DNA contendo apenas as sequências
transcritas em RNAs que, via de regra, correspondem aos
genes funcionais e incluem as sequências codificadoras dos
produtos (de RNA ou proteicos) correspondentes. A respeito
da construção de uma biblioteca de DNA, analisar os itens
abaixo:
I. A reação de síntese de cDNA é catalisada pela enzima
transcriptase reversa de retrovírus, que sintetiza uma
cadeia de DNA complementar a partir de uma cadeiamolde de RNA.
II. Essa técnica pode, ainda, ser utilizada na identificação de
polimorfismos, que determinam a alteração do padrão de
clivagem (devido a mutações pontuais em sítios de
restrição) obtido a partir de uma determinada região do
DNA.
III. Clones genômicos representam uma amostra aleatória de
todas as sequências de DNA de um organismo, e, com
raras exceções, uma biblioteca genômica será sempre a
mesma, independentemente do tipo de célula cujo DNA
for utilizado para construi-la.
IV. Os fragmentos de DNA marcados são separados no gel de
acordo com seu tamanho. Um feixe de laser rastreia o gel,
excitando os marcadores, que emitem luz em um
comprimento de onda específico, conforme o fluoróforo
utilizado.
Está(ão) CORRETO(S):