Uma grande parte das análises efetuadas em bioquímica clínica finaliza com a medida da quantidade de energia absorvida por uma
solução e isto obriga os analistas a conhecerem as teorias e os instrumentos empregados para a execução destas medidas. Analise as
proposições abaixo, tendo como base a espectrofotometria, a Lei de Beer e a Cromatografia.
I- A análise espectrofotométrica é uma medida qualitativa da absorção ou transmissão de energia provinda de uma luz branca que
passa por uma barreira selecionada de faixa de comprimento de onda, atravessando uma solução em análise e esbarrando em uma
célula fotoelétrica. Dessa forma, qualquer luz que não seja absorvida é transmitida a um detector, que transforma a energia
luminosa em elétrica.
II- As lâmpadas catódicas são usadas como fonte intensa de comprimento de onda muito estreita, tendo aplicação em cromatografia
líquida de alta eficiência (CLAE), que é um método de separação de compostos químicos em solução, que é utilizada na química
analítica para identificar e quantificar cada componente em uma mistura. Esta técnica consiste no bombeamento de um solvente
líquido pressurizado, contendo uma mistura que passa através de uma coluna preenchida com algum material sorvente. Cada
componente da amostra interage de forma diferenciada com esse material, gerando diferentes velocidades para cada componente
levando à separação conforme percorre a coluna.
III- A absorção de energia radiante é função logarítmica e a transmitância (%T) varia inversa e logaritmicamente com a concentração.
Essa relação matemática entre a transmitância e a absorbância é conhecida como a Lei de Lambert-Beer. Nessa lei, a
concentração da solução influencia na intensidade de absorção da amostra, independente da espessura da cubeta atravessada pela
radiação.
IV- As medidas espectrofotométricas se efetuam com amostras na temperatura ambiente. Porém, é sabido que variações na
temperatura não afetam a solubilidade e a dissociação das moléculas, uma vez que esses analitos estão na forma molecular.
V- A importância do uso do branco não reside apenas no estabelecimento da energia incidente (I0), mas também para compensar o
efeito de lente provocado pelas cubetas, perdas por reflexão e refração e eliminação da absorbância dos reagentes utilizados na
preparação das amostras.
É CORRETO o que se afirma em: