O estabelecimento de uma reação de PCR para o
diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de
amostras biológicas muitas vezes apresenta como maior
dificuldade a amplificação específica do fragmento genômico
do patógeno de interesse. As afirmativas a seguir enumeram
possibilidades para aumentar a especificidade da reação.
I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação
de PCR.
II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação
de PCR.
III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested),
utilizando par de iniciadores mais externos à região de
interesse na primeira reação, seguido da utilização de par
de iniciadores mais internos.