O método da ortotoluidina para detecção de glicose baseia-se na condensação da glicose, com uma amina aromática e ácido acético glacial. Esse método pode ser utilizado para detecção da glicose no plasma, porém não é eficaz em amostras de urina ou líquido cefalorraquidiano (LCR) devido à precipitação de proteínas existentes nessas substâncias metabólicas.