INSTRUÇÃO: Leia o texto a seguir para responder à questão.
O diagnóstico molecular in vitro tem ganhado cada vez mais
espaço no laboratório de Análises Clinicas devido à sua alta
sensibilidade e especificidade. Essas técnicas utilizam DNA
(ácido desoxirribonucleico) ou RNA (ácido ribonucleico)
ou as proteínas de um agente infeccioso presente
na amostra para a sua identificação. Várias são as
metodologias utilizadas.
A análise de polimorfismo de comprimento de fragmento de
restrição terminal (T- RFLP) é uma técnica molecular muito
útil na identificação de espécies microbianas e suas cepas.
Sobre essa metodologia, assinale com V as afirmativas
verdadeiras e com F as falsas.
( ) Na metodologia T- RFLP, um gene alvo é amplificado
por PCR, e o produto dessa reação é tratado com
enzimas de restrição que corta o DNA em regiões
específicas. Isso gera uma série de fragmentos de
DNA de comprimento variável, cujo número depende
de quantos cortes para enzima de restrição estão
presentes nessa sequência amplificada.
( ) A clivagem de amostras diferentes por uma mesma
enzima de restrição pode gerar um conjunto de
fragmentos de tamanhos diferentes.
( ) Na amplificação do DNA alvo pelo método de PCR,
são utilizados iniciadores marcados com corantes
fluorescentes. Após a ação das enzimas de restrição,
os fragmentos com a extremidade terminal marcada
por fluorescência são separados por eletroforese em
gel e dimensionados em um sequenciador de DNA
automatizado.
( ) Essa técnica permite a identificação de diferentes
microrganismos e suas cepas, entretanto não fornece
informações sobre a diversidade populacional de
uma comunidade bacteriana.